我國8種重要藥用真菌研究進展 ——藥用真菌專刊序言
《菌物學報》新年推出“藥用真菌???/font>
特約編輯:戴玉成 主編
中國是世界上藥用真菌生產(chǎn)和消費第一大國,近年來我國對藥用真菌的栽培、活性物質(zhì)、藥理活性、產(chǎn)品加工、保健品和藥品開發(fā)及利用等方面的研究都取得了重要進展,例如,近30年來已經(jīng)對靈芝和冬蟲夏草等最重要的藥用真菌開展了深入系統(tǒng)的研究,2014年我國靈芝總產(chǎn)量已經(jīng)達到1億千克,市場規(guī)模達到150億人民幣,與此同時,研究報道逐年增加,例如,據(jù)中國知網(wǎng)統(tǒng)計2006至2015年我國每年關(guān)于靈芝研究的中文報道超過120篇,同期SCI收錄的有關(guān)靈芝的論文每年超過230篇。特別是近年來關(guān)于桑黃和樺褐孔菌等新興藥用真菌的研究更是方興未艾(杜文婧和王琦 2013;吳升華等 2016;鐘秀宏等 2016;朱琳和崔寶凱 2016),因此藥用真菌一直是我國近年來真菌學研究的一個熱點領(lǐng)域。本期《菌物學報》“藥用真菌??笔珍浟?0篇文章,重點反映我國近年來在蛹蟲草Cordyceps militaris及蟲草類Cordyceps s.l.、白囊耙齒菌Irpex lacteus (Fr.) Fr.、豬苓Polyporus umbellatus (Pers.) Fr.、茯苓Wolfiporia cocos (F.A. Wolf) Ryvarden & Gilb.、蟬花蟲草Ophiocordyceps sobolifera (Hill ex Watson) G.H. Sung et al.、二型附毛孔菌Trichaptum biforme (Fr.) Ryvarden和桑黃Sanghuangporus sanghuang(Sheng H. Wu, T. Hatt. & Y.C. Dai) Sheng H. Wu et al.等重要藥用真菌研究的進展。
綜述文章是對藥用真菌熱點研究或藥用真菌新資源的總結(jié)。董曉明等(2017)對白囊耙齒菌這一廣泛分布、可用于治療腎小球腎炎的藥用多孔菌的形態(tài)特征、分布、生態(tài)習性、菌絲體培養(yǎng)和液體發(fā)酵、人工栽培、多糖的提取及其對腎臟作用、胞外酶及影響產(chǎn)酶因素等進行了總結(jié),同時對國內(nèi)外有關(guān)白囊耙齒菌專利和應(yīng)用進行了比較分析,并提出了目前研究中存在的問題,為其生物學研究和開發(fā)利用提供了依據(jù)和借鑒。傘形多孔菌是一種大型真菌,廣泛分布于北半球,其菌核為豬苓且與蜜環(huán)菌關(guān)系密切(柳玲玲等 2015)。豬苓作為中藥在我國有2 000多年的應(yīng)用歷史。陳曉梅等(2017a)對豬苓的主要化學成分包括多糖類、甾體類、三萜類、蒽醌類及其他化合物的結(jié)構(gòu)等進行了總結(jié),在此基礎(chǔ)上論述了豬苓的主要藥理活性,包括利尿和腎臟保護、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗輻射、抗突變等。其中多糖和甾酮類化合物是豬苓的主要活性成分,均具有抗腫瘤作用,它們對于藥材豬苓的質(zhì)量控制和品質(zhì)評價具有重要意義,此外還指出加強對豬苓多糖的化學結(jié)構(gòu)及其衍生物的研究及開展治療腫瘤和慢性肝炎的臨床應(yīng)用是今后豬苓研究的重要方向。蛹蟲草又名北蟲草、北冬蟲夏草,是蛹蟲草菌侵染昆蟲蛹或蟲形成的子實體,多發(fā)現(xiàn)于溫帶及低海拔的生境(林地),世界范圍內(nèi)分布廣泛,在我國主要分布于吉林、遼寧、山西、河北、陜西、安徽、廣西、廣東、云南、福建、四川等地,作為藥食兩用的真菌資源,蛹蟲草已被廣泛認識和接受(董彩虹等 2016)。文庭池等(2017)對蛹蟲草的寄主、分類學、菌種選育、人工培養(yǎng)、交配型、活性成分及其藥效、蛹蟲草產(chǎn)業(yè)化及發(fā)展趨勢等方面進行了論述,同時對目前研究和生產(chǎn)中存在的問題如子實體人工培養(yǎng)的退化、產(chǎn)品質(zhì)量標準和有效成分含量、食品安全、產(chǎn)品深加工和新產(chǎn)品的研發(fā)等方面進行了分析。此外還對蛹蟲草和冬蟲夏草進行了詳細比較,指出優(yōu)良菌種選育、高產(chǎn)技術(shù)、提高有效成分含量、生物合成、產(chǎn)業(yè)規(guī)?;c規(guī)范化以及產(chǎn)品深加工等方面都是今后蛹蟲草研究與開發(fā)的重要內(nèi)容。其中,N6-(2-羥乙基)腺苷(簡稱HEA)是蟲草菌絲體中得到的第一個生物來源的鈣離子拮抗劑,具有抑制癌細胞生長、降低炎癥反應(yīng)、保護腎臟、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和抗驚厥等多種功效,目前已成為研究熱點。劉寬博等(2017)對產(chǎn)生HEA的真菌種類和菌株來源、生理功能、生物合成、提取測定、分離純化、化學合成的研究現(xiàn)狀等方面進行了總結(jié),對有關(guān)專利進行了評價和分析,提出從種質(zhì)資源入手拓寬HEA來源,優(yōu)化HEA的提取純化方法,并深入探究其生物合成途徑,為HEA的深入研究和開發(fā)應(yīng)用提供了借鑒。
研究論文是對二型附毛孔菌抗氧化活性、蟬花蟲草HEA的鎮(zhèn)痛作用、豬苓甾酮類化合物的含量測定及指紋圖譜、豬苓菌絲形成菌核差異蛋白質(zhì)組學、MC-UVE波長選擇法在近紅外光譜對茯苓的鑒定和桑黃抗氧化活性等方面的研究。楊曉坡等(2017)對不同光照和pH條件下藥用真菌二型附毛孔菌液體培養(yǎng)過程中的抗氧化活性進行了研究,發(fā)現(xiàn)一定的光照可提高二型附毛孔菌分泌次級代謝產(chǎn)物的能力及抗氧化活性,14d光照條件下,多酚含量和總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)分別在第12天和第10天達到峰值,黑暗和光照交替的條件下,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性在第2天達到最大值。不同pH條件對二型附毛孔菌液體培養(yǎng)過程中的抗氧化活性影響更大。當pH為9.0時,二型附毛孔菌在液體培養(yǎng)過程中分泌的多酚含量、T-AOC、SOD活性和DPPH自由基清除能力均最高。朱偉堅等(2017)采用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)探索了蟬花蟲草中分離提取的HEA對痛風模型大鼠疼痛相關(guān)基因表達情況的影響,發(fā)現(xiàn)932個基因存在差異表達,其中有57個差異表達的基因與疼痛相關(guān),12個基因與鎮(zhèn)痛相關(guān),包括上調(diào)表達的腺苷A1受體基因(Adora1)及A2A受體基因(Adora2a)。而HEA可誘導(dǎo)鎮(zhèn)痛靶標受體腺苷A1受體表達上調(diào)、腺苷A2A受體表達下調(diào),指出蟬花蟲草的鎮(zhèn)痛活性物質(zhì)就是HEA,其可能是通過激活腺苷A1受體、下調(diào)A2A受體及調(diào)控一系列疼痛相關(guān)基因以發(fā)揮鎮(zhèn)痛的作用。陳曉梅等(2017b)對采自全國12個省區(qū)35個豬苓樣品中5個甾酮類化合物的含量進行了測定,在此基礎(chǔ)上獲得了它們的指紋圖譜并對圖譜數(shù)據(jù)進行分析,發(fā)現(xiàn)豬苓酮A和B的含量之間呈極顯著正相關(guān),陜西省樣品平均總甾酮含量及豬苓酮A和B的相對含量均最高,35個樣品之間指紋圖譜相似度達0.412–0.943,11個陜西省樣品之間指紋圖譜相似度達0.812–0.989,研究表明該省的豬苓質(zhì)量好且穩(wěn)定,進一步說明豬苓酮A和B是豬苓的主要甾酮類成分,對藥材豬苓的質(zhì)量控制有重要意義。李兵等(2017)對豬苓的蛋白質(zhì)組學進行了研究,成功鑒定了豬苓菌絲形成菌核的初始期、菌核生長期和成熟期的蛋白質(zhì)組,共鑒定蛋白1 391個。對初始期菌絲和菌核進行了差異蛋白質(zhì)組學研究,發(fā)現(xiàn)豬苓菌絲形成菌核過程中有378個蛋白差異表達,差異蛋白參與的蛋白功能和生物學過程以催化和結(jié)合為主,還參與感知環(huán)境刺激、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、電子轉(zhuǎn)移、過氧化活性、菌絲生長及胞壁合成等過程。分析得到豬苓菌絲形成菌核可能是由于缺氧或溫差等多種環(huán)境脅迫誘導(dǎo)所致,生成活性氧并形成氧化應(yīng)激狀態(tài),進而促進豬苓菌絲極性生長和菌絲形態(tài)學變化以形成菌核。代謝通路分析表明差異蛋白還主要參與了糖、脂質(zhì)和氨基酸等初級產(chǎn)物以及甾醇、多聚乙酰等次級代謝產(chǎn)物的合成與代謝。因此,對差異蛋白質(zhì)組的深入解析和研究有利于揭示豬苓菌絲形成菌核的蛋白分子機制。趙艷麗等(2017)利用近紅外光譜對云南不同產(chǎn)區(qū)的藥用真菌茯苓進行了鑒別,發(fā)現(xiàn)通過主成分-馬氏距離(PCA-MD)分析得到的白茯苓和茯苓皮的近紅外光譜在主成分得分空間內(nèi)呈現(xiàn)出較大差異。構(gòu)建不同產(chǎn)區(qū)茯苓的鑒別模型可以將白茯苓和茯苓皮分開,通過最優(yōu)主成分和采用MC-UVE法分別構(gòu)建了白茯苓和茯苓皮的分類模型,預(yù)測正確率分別由85.71%和83.33%提高至100%,在此基礎(chǔ)上進一步采用逐步判別分析法篩選出白茯苓和茯苓皮的光譜變量,建立Fisher判別方程,回代驗證正確率均大于85.7%,交叉驗證正確率均大于66.7%,表明所建立的Fisher判別方程能較好地鑒別不同產(chǎn)區(qū)的茯苓。鄭飛等(2017)以桑黃菌絲體生物量、多酚含量、黃酮含量、抗壞血酸(Ascorbic acid,AA)含量、T-AOC、抑制羥自由基能力、超氧陰離子清除能力、DPPH自由基清除能力、2,2’-連氮-雙(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)[2,2’-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline- 6-sulphonic acid),ABTS]自由基清除能力、鐵離子還原能力和亞鐵離子螯合能力為測定指標,對桑黃液體培養(yǎng)過程中的抗氧化活性進行了評價和分析,發(fā)現(xiàn)菌絲體生物量在2–10d內(nèi)增長迅速,第10天達到最大值,在此過程中AA含量和T-AOC也出現(xiàn)了峰值,且多酚含量、黃酮含量和鐵離子還原能力均呈上升趨勢,說明菌株的抗氧化活性與其自身的生長狀況、次級代謝產(chǎn)物分泌及還原能力等密切相關(guān)。此外,該菌株對羥自由基、超氧陰離子、DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力也較強,表現(xiàn)出明顯的抗氧化活性。較高的亞鐵離子螯合能力也說明桑黃在氧化脅迫下可啟動自身的抗氧化系統(tǒng)以阻斷自由基鏈反應(yīng)。